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    DNA Marker使用常见问题解答

    Q:电泳条带模糊?

    A:

    • 电泳缓冲液缓冲能力差。 电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲性能下降,可使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA条带迁移的现象。

    • 电压过高,电泳时间过长。电泳时电压不应该超过20 V/cm,电泳温度应该低于30℃。如果电泳时电压和温度过高,可能导致出现条带模糊和不规则的DNA条带迁移的现象。特别是电压太高易出现缺带现象。电泳过程中由于会产热,因此电泳时间长容易发生条带模糊,特别是小片段会变得模糊。

    • 凝胶放置时间太长或琼脂糖的质量差,导致DNA 条带分辨率降低。


    Q:DNA Marker 降解?

    A:污染了核酸外切酶。建议用灭菌的枪头,用后及时将管盖拧紧。点样时勿将电泳缓冲液带入管中,建议更换枪头。


    Q:用EB琼脂糖胶电泳不同时间会出现条带亮度变化?

    A:由于电泳过程中条带与EB泳动方向相反,结合EB的量会随时间变化,因此电泳后条带亮度会发生变化。因此建议使用EB染胶实现精准定量。


    Q:DNA Marker电泳条带分离效果不好?

    A:琼脂糖制胶浓度不合适,导致分辨率降低。制胶不均匀有时也会导致电泳异常。建议使用新制备的凝胶,制胶时注意操作中带来的浓度误差。一般对于大分子量片段,低浓度胶分离效果好;对于小分子量片段,高浓度胶分离效果好。


    Q:不同核酸染料对DNA Marker 迁移率的影响?

    A:预加GeneFinder、GelStain、GoldView到DNA Marker中,对Marker的迁移率都有一定的影响。

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