产品详情介绍
本产品用于对各类生物制品中的Vero细胞DNA进行定量检测。
本产品原理为利用在PCR体系中加入荧光探针 (TaqMan或Molecular Beacon等),扩增过程中其荧光量与扩增产物量成正比,通过荧光量的检测测定样品核酸量。本产品中的Vero qPCR SuperMix (2×)含PerfectStart Taq热启动酶 (利用3种单克隆抗体与Taq DNA Polymerase高效结合,有效地封闭了DNA聚合酶活性,阻止了低温下的非特异性扩增)、针对Vero细胞DNA检测特殊优化的qPCR反应缓冲液、dNTPs、PCR增强剂、稳定剂。此外,本反应液引入了dUTP/UDG系统,可在反转录前降解含U的ssDNA和dsDNA,消除由PCR产物导致的交叉污染。
线性范围广
以10倍梯度稀释的Vero DNA标准品为模板,使用 TransGen 产品进行定量检测。结果表明,TransGen 产品具有宽广的线性范围。
专属性强
定量限低
检测3 fg/μl,1 fg/μl,0.5 fg/μl,0.1 fg/μl,0.01 fg/μl Vero DNA标准品。0.5 fg/μl及以上浓度10个重复孔的CV值<20%(参考中国药典(2015年版):生物样品定量分析方法验证指导原则),即本试剂盒的定量限为0.5 fg/μl。
耐用性强
将不同超声条件处理后的Vero细胞基因组DNA进行10倍梯度稀释(300 pg/μl - 300 fg/μl )并进行检测。结果表明,DNA的碎片化不会对检测结果造成影响。
稳定性强
不同温度保存
以10倍梯度稀释(300 pg/μl - 3 fg/μl )的Vero DNA标准品为模板,使用经不同保存条件处理(4 ℃、 室温、37 ℃保存8天, - 20 ℃正常保存)的TransGen 产品进行检测, 结果表明,产品性能不受影响,仍可稳定扩增。
反复冻融测试
以10倍梯度稀释(300 pg/μl - 3 fg/μl )的Vero DNA标准品为模板,使用经反复冻融处理的TransGen 产品进行检测,结果表明,产品性能不受影响,仍可稳定扩增。
宿主残留检测介绍视频