产品详情介绍
p24是HIV病毒颗粒中高度保守的、含量最多的主要结构蛋白，是结构基因gag编码的产物，在病毒的包装和成熟过程中起到关键作用。慢病毒载体则是在HIV-1病毒基础上改造而生成的病毒载体系统，可以高效地将目的基因转入到细胞中。p24 蛋白的含量代表着慢病毒的颗粒数，因此，可通过ELISA方法检测p24含量来测定慢病毒的物理滴度。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法定量测定慢病毒上清中HIV-p24含量。本试剂盒采用高亲和力的HIV-p24抗体预包被酶标板，将病毒裂解液和标准品/待测样本加入微板孔中，经过孵育后样本中存在的HIV-p24会与酶标板上的预包被抗体特异性结合。洗涤去除未结合物后，将生物素标记的HIV-p24检测抗体加入微板孔中，再次孵育后检测抗体会与锚定在酶标板上的HIV-p24特异性结合。随后，将辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育，通过检测抗体上的生物素和链霉亲和素发生的高强度非共价结合，形成“包被抗体- HIV-p24蛋白-检测抗体-Streptavidin-HRP”免疫复合物。再次洗涤后，将显色底物TMB加至微板孔中，HRP会催化TMB底物生成蓝色产物，颜色反应的深浅将与样本中HIV-p24的浓度成正相关。而后加入终止液终止反应，在450 nm波长(参考波长570-630 nm)处测定吸光度值。通过绘制标准曲线，由样本吸光度值可计算出样本中所含HIV-p24浓度。本试剂盒特异性强、检测灵敏度高，同时操作更加便捷。
检测步骤
HIV-p24 ELISA Kit 通过裂解液将慢病毒颗粒中的p24蛋白释放出来，然后与酶标板上的预包被p24抗体结合，洗涤去除未结合物，加入生物素标记的p24检测抗体，再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)，形成“包被抗体- HIV-p24蛋白-检测抗体-Streptavidin-HRP”免疫复合物，通过显色底物TMB颜色反应的深浅指示样本中HIV-p24的浓度。
标准曲线OD值示例
标准曲线
以标准品理论浓度与对应OD值进行四参数拟合，得到标准曲线，由标准曲线可知，TransGen 产品指标良好。
